Стр. 103 - Северин С.Е. (ред.) Биологическая химия с упражнениями и зад

Упрощенная HTML-версия

100
Модуль
2.
Энэимология
-для энзимодиагностики исnользуют ферменты , имеющие преиму­
щественную или абсолютную локализацию в оnределенных органах
(органоспецифичноеть):
-количество высвобождаемого фермента должно быть nропорuиональ­
но степени повреждения ткани и достаточно для оnределения его
активности;
- активность ферментов в биологических жидкостях, обнаруживаемых
nри повреждении клеток , отличается от нормальных значений и ста­
бильна в течение достаточно длительного времени (сутки) ;
-появление в плазме крови ферментов, имеющих тол ько uитозольную
локализацию, свидетельствует о восnалительном процессе; при обна­
ружении митохондриальных или ядерных ферментов можно говорить
о более глубоких повреждениях клетки , например ~•екрозе.
Ферменты , катализирующие одну и ту же химическую реакцию, но с раз­
ной первичной структурой белка, называют изоферментами. Они отлича­
ются друг от друга кинетическими nараметрам и, условиям и активации,
особен ностя ми связи алофермента и кофермента. Природа ПОЯВJIСIIИЯ
изоферментов разнообразна, но чаще всего обусловлена разл ичиями в
структуре генов. кодирующих эти изоферменты или их субъсдини uы.
Н а различиях в физико-химических свойствах и основаны методы оnре­
деления изоферментов. Изоферменты часто являются органоепецифичными ,
так как в каждой ткан и содержится преимуществен но оди н тип изофермен­
тов. Следовательно, nри поврежден ии органа в крови nоявляется соответ­
ствующая форма изофермента. Обнаружение определенных изоферментных
форм ферментов позволяет исnользовать их для диагностики заболеваний.
Наnример, фермент лактатдегидроrеназа (ЛДГ) катал изирует обратимую
реакцию окисления лактата (молочной кислоты) до nирувата (пировино­
градной кислоты) (рис.
2.31).
Лактатдегидрогеназа
-
ол игомерный белок
с мол. массой
134 000,
состоящий из четырех субъединиц двух тиnов
-
М
(от англ .
muscle -
мышца) и Н (от англ.
heart -
сердце). Комбинация этих
субъединиц лежит в основе формирования пяти изоформ лактатдегидрогена­
зы (рис.
2.32,
А). ЛДГ
1
и ЛДГ
2
наиболее активны в сердечной мышце и почках,
ЛД Г
4
и ЛДГ
5
- в скелетных мышцах и печени. В остальных тканях имеются
другие варианты этого фермента . Изоформы ЛДГ различаются друг от друга
электрофорети чеекой nодвижностью, что позволяет устанавливать тканевую
nринадлежиость изоформ ЛДГ (рис.
2.32,
Б). Для диагностики заболеваний
сердца neчcJiИ и мышц необходимо исследование изоформ ЛДГ в плазме крови
методом 3лектрофореза. На рис.
2.32,
В представлены электрофорсграм мы
СН
3
1
НС-ОН
соон
Лактат
Лакт·dтзеr•wроrеназа
Nдо•
NADH
+
н•
~
..
..
~
NдD+
NADH +
н+
СН
3
1
С=О
соон
Пируват
Рис.
2.31.
Реакция , катализируемая ,,актатдеrидроrеиазой (ЛДГ)