Стр. 164 - Северин С.Е. (ред.) Биологическая химия с упражнениями и зад

Упрощенная HTML-версия

Модульная единица
3
161
рестриктазы
-
бактериальн ые ферменты из груnnы эндонуклеаз.
Они «узнают» короткую слеlfИфическую nоследовательность нук­
леотидов в ДН К длиной в
4-6,
реже в
8-12
пар оснований и расщеn­
ляют обе нити. В настояшее время из бактериальных источников
выделены сотни рестриктаз с разной субстратной сnецифичностью.
Расщеnлен ие обеих нитей ДН К может nроисходить двояким nутем­
с образованием двухцелочеч ных (.туnых•) или одноцелочечных
(«Л ИПКИХ») КОНЦОВ.
Синтез рекомбинантных ДНК. Образованные с ло~10шью рестриктаз
фраг:.tенть• гена, имеющие «лиnкий» конеu , могут
no
nринцилу комnлемен­
тарности взаимодействовать с «Л иnким•> конuом другого, не родственного
~чу фрагмента ДН К, который может nринадлежать бактериофагу, сирусу
11.1н плазмиле и получаться nри действии на ДНК той же самой рестрикта-
3Ы (рис .
3.27).
Фрагменты ковалентно соединяют друг с другом с ломошью
фермента ДНК-лиrазы и nолучают рекомбинантные (ил и гибридные) ДН К .
днк х
5'
1
5~
G
С ТТ АА
1 1 1
1
1
3
:-~~------.J
s:1
3:..~
. 3.
5'
1
1
1
1
1
1 1
GAA
ТТС
СТТ
AAG
1
1
1
1
1
1
1
днк у
6
л л
1-+ <:
т т
1
~
1
у
1
1 1 1 1 1
АА ТТ С
G
о
~-3.
~--5'
Рис.
3.27.
Образование молекул рекомбинантной ДИК с помощью рестрнктаэ и ДНК­
.шrазы:
.JHK
Х и ДНК У - две молекулы ДНК из различных источников; Есо
RI -
бактери­
а.lьная рестрикuионная экдонуклеаза