Стр. 92 - biohimia

Упрощенная HTML-версия

Биологическая химия
92
С этой целью из тканей и клеток, содержащих ядра лейкоцитов, слюны,
мочи, биоптатов, гистологических срезов, выделяют ДНК и фрагментируют
с помощью гидролитических ферментов —
рестриктаз.
Рестриктазы узнают
определенные короткие последовательности нуклеотидов (4–6 нуклеотидных
пар) и расщепляют обе нити ДНК с образованием двуцепочечных («слепых»)
или одноцепочечных («липких») концов. Количества каждого фрагмента
очень мало, поэтому нужный для исследования фрагмент многократно удваи-
вают (амплифицируют) с помощью полимеразной цепной реакции (ПЦР) или
в составе рекомбинантной ДНК.
Рекомбинантные ДНК
— ДНК, построенные из участков разного происхожде-
ния. Их получают следующим образом: ДНК из двух разных источников, чаще
всего ДНК человека и ДНК плазмиды (небольших кольцевых молекул ДНК,
способных автономно реплицироваться в бактериальных клетках), или вируса,
Рис. 3.27. Образование мРНК, кодирующей строение одной из
Н-цепей иммуноглобулинов.
Ген, кодирующий одну из возможных тяжелых цепей Ig, образуется в результате двух по-
следовательных рекомбинаций, которые объединяют сегменты вариабельного домена и
приближают их к константному сегменту. Удаление лишних J сегментов и интронов про-
исходит в ходе посттранскрипционной модификации пре-мРНК sp — экзон, кодирующий
сигнальный пептид