Стр. 108 - А.Я.Николаев - Биологическая химия (2004)

Упрощенная HTML-версия

Глава 3. Строение нуклеиновых кислот
ДНК кролика РНК кролика денатурированные ДНК и РНК гибрид ДНК-РНК
Рис. 3.15. Гибридизация нуклеиновых кислот:
а —- гибридизация ДНК -ДНК ;
б —
гибридизация ДНК -РНК
молекуда РНК (точнее — первичный транскрипт, см. гл. 4) комплементарна опре­
деленному участку ДНК того же организма. Это означает, что все соображения
относительно видовой специфичности ДНК в равной мере применимы и к РНК.
ДНК-зонды
Если ДНК человека разрезать с помощью рестриктаз на фрагменты длиной 4000
нуклеотидов, то получится около I млн фрагментов. Как в такой груде найти и
извлечь из нее искомый фрагмент? Это можно сделать, используя ДНК-зонды.
Зонды представляют собой фрагменты одноцепочечной ДНК длиной около 20
нуклеотидов, содержащие радиоактивную (например, 32P) или другую метку. Нук­
леотидная последовательность зонда должна быть комплементарна какой-то час­
ти искомого фрагмента ДНК. Зонд вносят в раствор фрагментов ДНК, смесь на­
гревают для денатурации ДНК, затем охлаждают для ренативации ДНК. При этом
часть искомых фрагментов соединится с зондом, таким образом искомый ген ока­
жется меченым (рис. 3.16). Затем смесь разделяют электрофорезом и по наличию
радиоактивной метки находят нужный фрагмент. РНК тоже можно использовать
в качестве зонда.